细菌学检查
该检查分为标本直接涂片镜检和结核分枝杆菌培养。也是诊断结核病的直接证据。标本直接涂片染色镜检分为初筛试验的金胺“O”荧光染色和确证试验的齐-尼抗酸染色两种，标本类型可以是呼吸道标本、尿液、腹水、胸水等其他任何体液标本。1、金胺“O”荧光染色：其原理是分支杆菌被AuramnieO-罗丹明荧光染液染色及复染后，在紫外光源的荧光显微镜低倍镜下，菌体呈亮*色，而其他细菌以及背景物质暗*色。分支杆菌与背景形成鲜明的颜色对比，因此能快速的找到抗酸杆菌。该方法灵敏度高，特异性差，该染色方法只是初筛，不能确证为抗酸杆菌。2、齐-尼抗酸染色原理：由于分枝杆菌细胞壁含有大量脂质，因此经5%苯酚复红染色后，不能被3%盐酸酒精脱色，而被染色红色，背景染成蓝色，被形容为“万蓝丛中一抹红”，该方法分为标本直接涂片染色和浓缩集菌涂片染色。直接涂片染色：用接种环挑取患者的标本直接涂片，然后进行齐-尼抗酸染色。该方法只适合于大量排菌的患者，敏感性极低。浓缩集菌涂片染色：将患者的留取的标本全部收集消化离心，取沉淀涂片，然后进行齐-尼抗酸染色。对于直接涂片镜检不易检出结核杆菌的，可以采用该方法，以提高结核杆菌的检出率。标本涂片抗酸染色对于怀疑结核并且排菌的患者是简单、经济的方法，也是临床最常用的检测手段。但需要注意的是，由于很多病人是间歇性的排菌，因此要连续送检三天，每天一次。即使连续送检三次，其阳性率也很低，不到30%。需要提醒的是抗酸杆菌阳性不一定意味着就得了结核，麻风分枝杆菌，非结核分枝杆菌也会呈阳性，特别是一些放化疗患者，由于免疫力低下，容易发生非结核分枝杆菌感染。所以临床需要医生结合临床并综合其他检查综合分析才能诊断。结核杆菌培养结核分枝杆菌培养为诊断结核病的金标准，也可以进行结核分支杆菌的药敏实验，能更精准的指导临床合理使用抗结核药物。文献报道培养的阳性率大约为85%。但结核杆菌生长缓慢，培养周期比较长，传统的罗氏培养法大约需要1月，全自动培养法平均报阳时间为2周左右。因为结核培养要求负压实验室、昂贵的全自动培养仪器等缺点，临床不太常用该方法。分子生物学检查
利用分子生物的方法可直接从临床标本(呼吸道标本，骨髓，组织、脑脊液、胸腹水等)检测分枝杆菌的RNA或DNA，具有快速、特异性高，灵敏度高等优点。适合于各种临床标本。实验室常用的分子生物学检查方法为：PCR-结核杆菌检测（荧光定量PCR）和XpertMTB/RIF技术。1、PCR-结核杆菌检测（荧光定量PCR）：设计结核分支杆菌特异rRNA片段的引物进行扩增，然后用结核分支杆菌rRNA序列特异的DNA荧光探针杂交。其特异性和敏感性均超过95%。一方面准确、快速、简便；另一方面能够大大提高结核杆菌的检出率。该方法适合临床任何标本（脑脊液、胸腹水、尿液、脓液等）。便于结核病患者得到早期诊治，尤其是抗酸染色阴性的活动性结核病患者。该方法最重要的一点是可以区分结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌且价格经济实惠。2、XpertMTB/RIF技术：随着分子生物学技术的发展，越来越多的分子诊断技术不断涌现，XpertMTB/RIF技术便是其中之一。其以全自动半巢式实时PCR技术为基础，以rpoB基因耐药决定区为靶基因，能够在2小时内通过对分枝杆菌（MTB）、利福平（RIF）耐药性进行检测。判断是否有MTB，及MTB对RIF是否耐药。新英格兰杂志公布的研究结果表明，以培养法为参考标准XpertMTB/RIF的特异性为99.2%，敏感性为92.2%，年WHO首次将其推荐为检出结核的检测方法，对于怀疑结核病的所有患者，优先推荐XpertMTB/RIF做初步诊断。免疫学检查
利用免疫学方法检测结核杆菌的抗原或者刺激机体产生的相应的抗体，免疫学检查主要包括结核菌素试验（PPD）和结核感染T细胞斑点实验（TSPOT.TB）。TSPOT.TB是检测结核杆菌感染的新的免疫学方法，近年来比较推崇的结核杆菌检测项目。新版《肺结核诊断标准》也把该项目增加到诊断结核病的实验室检查项目中。多个国家指南建议在抗TNF-α治疗自身免疫性疾病前，推荐采用TSPOT.TB方法进行结核感染筛查。该试验主要通过免疫学方法检测结核杆菌刺激特异性T淋巴细胞而产生的γ-干扰素，进而反映体内是否有结核杆菌感染。该方法不受患者免疫状态以及体内白细胞数量尤其是T细胞数量水平的影响。国内外文献报道该方法具有较好的特异性和灵敏度。缺点为TSPOT.TB阳性，不能判断是活动性结核还是陈旧性结核。必须结合临床症状和其他检查综合判断。但TSPOT.TB阴性的意义比较大，如果该试验阴性，一般可以排除结核病。该检查项目对于协助不排菌的肺结核、儿童结核感染、原发性结核以及肺外结核的诊断很好的试验。介绍了这么多，大家是不是已经晕了？其实每一种方法有其优点，也有其缺点，即是相互补充，又是相互印证。简单总结一下：如果高度怀疑患者肺结核，推荐选细菌学检查和分子生物学检查；如果高度怀疑患者肺结核，而多次标本涂片抗酸染色阴性的患者，推荐分子生物学检查和TSPOT.TB组合；如果患者怀疑肺外结核，首先推荐分子生物学检查和TSPOT.TB组合，其次细菌学检查；如果想排除结核杆菌感染，推荐TSPOT.TB。但还需要临床医生根据患者病情，具体问题具体分析，采取个体化检测治疗。更多精彩